培养高成活率黄精组培苗的技术流程及移栽方法

一、材料选择及消毒

1. 材料选择

在3~4月份，应选择当年生长健壮、无病虫害的黄精植株中的组织培养外植体，以其根鉴为繁殖材料。

黄精

2. 消毒

先用水刷洗材料的地下块茎，去掉叶片和根系，并切下根状茎上的芽。接着，用200mg/L羧苄西林钠或头孢唑林钠进行浸泡处理5小时，期间进行振荡（26℃，每分钟112转）。取出材料后用无菌水清洗2次，然后用75%乙醇漂洗30秒，最后再用无菌水清洗1次，用1g/L氧化汞灭菌5分钟。处理完毕后，用无菌水清洗3次并晾干，然后将其切成大小约为0.5cm的块，接种于培养基上。

二、愈伤组织培养和芽分化

经过切分处理的无菌外植体应接入MS+NAA 1.5mg/L+ KT 1.5mg/L培养基中，约15天左右即有启动痕迹。在培养25天左右，根茎芽周围开始冒出新芽，但生长势较弱，有效芽数量较少；在培养35天左右，根茎芽周围有大量新芽冒出，且其生长势逐渐增强，有效芽数量也随之增多；在培养45天左右，新生芽的数量达到最大值，生长势最强，有效芽数目趋于稳定；在培养55天左右，新生芽的生长趋势明显下降，有效芽数目趋于稳定，芽体开始变黄；在培养65天后，新生芽体生长趋势进一步下降，芽体萎靡现象明显，出现新生芽体枯死衰退情况。

三、黄精的继代增殖培养

待愈伤组织或不定芽形成后，将分化的不定芽块茎切成大小约为0.5cm的小块转接至增殖培养基(MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.2ng/L)中。连续继代增殖培养可达7~8代，增殖率一般为4~6倍。继代培养的培养时间为45~55天为宜。

四、黄精的生根苗培养

将继代增殖培养的组培材料转移至生根培养基(1/2MS+NAA1.0mg/L+活性炭0.20g/L)中进行增殖培养，30天后即可长出根，生根率可达90%以上。

这些步骤所用的基础培养基都加入了蔗糖20g/L、琼脂5g/L，pH值在5.8~6.8之间。培养环境温度应在25℃±2℃，光照强度为2000~30001x，光照时间每天10~16小时。

五、炼苗移栽

在生根45天后，应将组培材料敞开培养瓶，进行为期3天的炼苗处理。然后，选择根长大约为2~3cm，同时根数多于3条的芽的植株，并将其洗净培养基后移栽至基质(泥炭土:沙:珍珠岩=2:2:1)中。置于18~20℃温度下，土壤湿度保持在50%~60%之间，每1~2周喷施1次叶面肥。2个月后，黄精组培苗成活率可达90%以上。